顯微課堂 | 與Helmut Gnaegi一起掌握聚合物超薄切片技術

專家級超薄切片技術，精準洞察和優異性能

說到超薄切片技術，很少有人能像Helmut Gnaegi這樣*。作為金剛石切片刀公司Diatome的聯合創始人，Helmut花了數十年時間*切片的藝術和科學。在這次專訪中，他分享了自己在聚合物切片方面的深厚專業知識——從刀具幾何形狀的細微差別到低溫技術的挑戰。無論您是經驗豐富的顯微鏡專家，還是剛剛起步，Helmut的見解都能為您提供實用的指導和靈感，幫助您實現切割。

主要經驗:

超薄切片確保結構完整性——是制作高質量、無損傷聚合物切片的理想選擇。

低溫切片需要精準的操作——需要專用工具技術。

正確的樣品固定方法至關重要——可防止樣品變形并保持材料特性。

切片刀的選擇必須與應用相匹配——使用針對低溫或室溫條件選擇合適的切片刀。

精確修塊是基礎——實現干凈、一致的切片條帶。

根據應用目的選擇方法——根據成像目標（表面結構與內部結構）定制方法。

切刀片背后故事：Helmut Gn?gi對聚合物超薄切片的專業見解——Diatome

Helmut Gn?gi是世界上尤其值得信賴的金剛石切片刀公司之一的聯合創始人，他花了幾十年時間打磨超薄切片技術。我們與他坐在一起，從切片刀的幾何形狀到低溫挑戰，了解聚合物切片的微妙之處。

您是如何進入超薄切片領域的？

Helmut Gn?gi：我最初是一名機械工程師，但后來迷上了超薄切片技術。我們早期制造的都是手動拋光機，我看到了可以改進的地方。那時，像 Fernández-Morán這樣的研究人員需要大腦切片用于TEM觀察。這一挑戰成為我畢生的事業。

如今，人們為什么使用超薄切片技術，而不是FIB或低溫等離子或其他技術？

Helmut Gn?gi：超薄切片仍然是獲得高質量聚合物切片的最干凈的方法。FIB和等離子方法會造成損傷--高溫、離子和變形。而超薄切片則能保持材料的特性，特別是對于精細或多層聚合物。

重要見解

超薄切片技術可提供無損傷、薄而光滑的切片，是TEM、AFM和表面敏感技術（如原子力顯微鏡）的理想之選。詳見徠卡顯微系統公司最新推出的超薄切片機UC Enuity。

室溫和低溫下聚合物切片的主要區別是什么？

Helmut Gn?gi：在室溫下，切片是漂浮的——你可以看到它們，也很容易拿起它們。而在低溫下，情況就不同了。它們容易卷曲，更難處理。你需要技巧和合適的工具，比如用睫毛來壓平或引導它們。

聚合物在切片前應如何固定？有什么技巧嗎？

Helmut Gn?gi：正確的固定方式非常重要。如果樣品彎曲，結構可能會發生變化。在進行超薄切片之前，應小心修剪聚苯乙烯等易碎聚合物。對于薄的聚合物薄膜，我一直建議使用凝膠將其夾在金屬框架之間。對于精細的低溫樣品，OCT效果很好，但不要讓它影響成像。

在聚合物切片時，人們最容易犯的錯誤是什么？

Helmut Gn?gi： 他們用錯了刀，或者刀已經不鋒利了。并不是所有的金剛石切片刀性能都一樣，尤其是在低溫條件下。有些金剛石切片刀是為了切割包埋樹脂而制造的，而不是進行干切。此外，修塊也經常被省略或做得不好。

提示：始終根據切片條件（低溫與常溫）選擇合適的刀具類型，并確保精確修塊，以獲得干凈的切片條帶。

對于聚合物切片新手，您最大的建議是什么？

Helmut Gn?gi：了解您要切割的是什么，為什么要切割。是為了表面成像？內部結構？每種用途都需要不同的設置，而且要始終尊重切片刀。不了解應用，就無法制造出好的切片刀。

專家提示

• 避免彎曲堅硬的聚合物；扣住，而不要切斷。

• 使用AFM樣品夾和膠水夾來固定薄箔樣品。

• 修塊質量很重要，要使用適合低溫和室溫的修塊刀。

• 在冷凍過程中，要準備好處理可能比較棘手的波浪狀切片（準備好毛發、睫毛或粘在木棍上的達爾馬提亞狗毛發）。

• 并不是所有的金剛石切片刀都是一樣的，請向您的供應商詢問干切實驗的兼容性（直接聯系 DIATOME 或通過您當地的 Leica 銷售專家）。

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